clickchemistrytools  1498-25說明書

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clickchemistrytools 二硫化物生物素炔烴說明書

clickchemistrytools 1498-1

Disulfide Biotin Alkyne

分子量

647.87

剩余分子量

143.20

化學成分

第二季度

CAS

不適用

溶解性

玻璃狀無定形固體

外貌

黃色無定形固體至黃色油

儲存條件

-20°C。

裝運條件

環境溫度

鏈霉親和素-生物素相互作用的非凡強度允許有效捕獲甚至高度稀釋的目標；然而，這使得從親和樹脂中回收蛋白質具有挑戰性。從固定化抗生物素中洗脫生物素化蛋白質的常規方法包括：（i）通過在變性緩沖液中煮沸樹脂使鏈霉親和素變性，變性緩沖液可能包括高濃度的離液鹽；（ii）蛋白質與樹脂結合時胰蛋白酶消化；或（iii）用過量游離生物素洗脫蛋白質。這些方案可以通過與標記的蛋白質同時釋放非特異性結合的蛋白質和/或天然生物素化的蛋白質來共同洗脫污染物蛋白質。此外，這些方法中的一些可能導致高水平的樹脂基肽與感興趣的蛋白質一起洗脫，導致進一步的樣品污染。

二硫化物生物素炔探針消除了鏈霉親和素-生物素親和純化的主要限制。該試劑包含一個生物素部分，該生物素部分通過含有可裂解的二硫鍵的間隔臂與炔基連接。捕獲的生物分子可在溫和條件下（50mM二硫蘇糖醇、10mM 2-巰基y醇或1%硼氫化納）和切割后留在標記蛋白上的小分子片段（143.20Da）有效釋放。這些特征使得可裂解探針在生物分子標記和蛋白質組學研究中特別有吸引力。